Гибридизация in situ позволяет точно картировать транскрипты РНК в тканях растений. скачать в хорошем качестве

Гибридизация in situ позволяет точно картировать транскрипты РНК в тканях растений.

Ссылка: https://app.jove.com/t/3328/in-situ-h... Гибридизация in situ (ISH) — это мощный метод, используемый для точной локализации РНК-транскриптов в тканях растений. Этот метод позволяет исследователям визуализировать пространственное распределение специфических молекул мРНК, предоставляя информацию о закономерностях экспрессии генов на клеточном уровне. Используя меченые комплементарные РНК- или ДНК-зонды, которые гибридизуются с целевыми транскриптами, ISH позволяет идентифицировать активность генов на различных стадиях развития и в различных условиях окружающей среды. Возможность наблюдать эти транскрипты в их естественном контексте имеет решающее значение для понимания функциональной роли генов в биологии растений. Процесс гибридизации in situ включает несколько важных этапов, начиная с подготовки срезов растительной ткани. Эти срезы обычно фиксируют и пермеабилизируют для облегчения доступа зондов к целевым РНК. После этого наносят меченые зонды, позволяющие им гибридизоваться с комплементарными последовательностями, присутствующими в транскриптах. После серии этапов промывки для удаления несвязанных зондов используются методы обнаружения, такие как флуоресцентные или хромогенные субстраты, для визуализации гибридизованных зондов. Такой тщательный подход гарантирует, что полученные изображения точно отражают локализацию транскриптов внутри растительных клеток. Применение гибридизации in situ в исследованиях растений значительно расширило наше понимание различных биологических процессов, включая развитие, реакции на стресс и сигнальные пути. Выявляя сложные закономерности экспрессии генов, ISH способствует выяснению сложных регуляторных сетей, управляющих ростом и адаптацией растений. Кроме того, этот метод может быть объединен с другими молекулярными методами, такими как транскриптомика и геномика, для получения всестороннего представления о функциях и взаимодействии генов. В результате гибридизация in situ остается незаменимым инструментом в молекулярной биологии растений, способствуя открытиям, которые расширяют наши знания о физиологии и эволюции растений.