فك شفرة البروتين скачать в хорошем качестве

فك شفرة البروتين

1. تنقية البروتين والنشاط النوعي #تنقية_البروتين #النشاط_النوعي • هدف التنقية هو إزالة البروتينات غير المرغوب فيها؛ لذا في كل خطوة ناجحة، يقل "إجمالي البروتين" ولكن يزداد "النشاط النوعي" (Specific activity) (نسبة نشاط الإنزيم إلى إجمالي البروتين). • يعتبر البروتين نقياً عندما لا تؤدي خطوات التنقية الإضافية لزيادة النشاط النوعي، وعندما يظهر كحزمة واحدة فقط في الفصل الكهربي. 2. الفصل الكهربي ثنائي الأبعاد (2D) #الفصل_الكهربي #الوزن_الجزيئي • تستخدم هذه التقنية لفصل خليط معقد من آلاف البروتينات بناءً على خاصيتين: نقطة التعادل الكهربي (pI) في البعد الأول، والوزن الجزيئي في البعد الثاني. • تسمح هذه الطريقة بدقة عالية جداً في التمييز بين البروتينات المختلفة داخل الخلية الواحدة. 3. العلاقة بين التتابع والوظيفة #تتابع_الأحماض_الأمينية #الأمراض_الوراثية • كل بروتين له تتابع فريد من الأحماض الأمينية يحدد شكله ثلاثي الأبعاد وبالتالي وظيفته الحيوية. • تغيير حمض أميني واحد فقط في التتابع قد يؤدي لإنتاج بروتين تالف، وهو السبب وراء ثلث الأمراض الوراثية البشرية تقريباً. 4. طرق تحديد التتابع (Sanger & Edman) #تحديد_التتابع #تفاعل_إدمان • طريقة سنجر: استخدمت لتحديد تتابع الإنسولين، وتعتمد على تحديد الحمض الأميني في الطرف النيتروجيني (N-terminal). • تفاعل إدمان (Edman degradation): الطريقة الأكثر شيوعاً حالياً؛ حيث يتم تسمية وإزالة الحمض الأميني الطرفي فقط وتكرار العملية دون تدمير بقية السلسلة، مما يسمح بمعرفة التتابع بالكامل آلياً. 5. التعامل مع البروتينات الكبيرة والروابط الكبريتية #تجزئة_البروتين #روابط_الكبريت • لأن دقة التسلسل تقل مع طول السلسلة، يتم تقطيع البروتينات الكبيرة لقطع صغيرة باستخدام إنزيمات متخصصة (Proteases) مثل التريبسين. • يجب كسر الروابط الكبريتية (Disulfide bonds) كيميائياً قبل البدء في تحديد التتابع لأنها تعيق عملية التسلسل وفصل السلاسل الببتيدية. هل تحب أن نلقي نظرة على مثال عملي لكيفية حساب "النشاط النوعي" من جدول تنقية، أم ننتقل لتفاصيل "تفاعل إدمان"؟