Исследуется производство рекомбинантных белков в метилотрофных дрожжах Pichia pastoris. скачать в хорошем качестве

Исследуется производство рекомбинантных белков в метилотрофных дрожжах Pichia pastoris.

Ссылка: https://app.jove.com/t/1862/expressio... Pichia pastoris широко используется в качестве хозяина для производства рекомбинантных белков благодаря своей способности эффективно экспрессировать и секретировать большое количество гетерологичных белков. Этот вид дрожжей обладает рядом преимуществ, включая простоту генетической манипуляции, высокую скорость роста и способность к посттрансляционным модификациям, аналогичным тем, что наблюдаются в клетках млекопитающих. Исследователи часто выбирают Pichia pastoris в качестве организма-хозяина для производства белка благодаря её хорошо отлаженной системе экспрессии и способности достигать высокого выхода правильно свёрнутых и функциональных белков. Кроме того, Pichia pastoris имеет богатый опыт успешной экспрессии белков и была тщательно изучена и оптимизирована для этой цели. Генетическая манипуляция с ней относительно проста, что позволяет легко встраивать чужеродные гены в её геном. В сочетании с высокой скоростью роста это делает Pichia pastoris высокоэффективным и экономичным хозяином для крупномасштабного производства белка. Одним из ключевых преимуществ Pichia pastoris является её способность к посттрансляционным модификациям, таким как гликозилирование, аналогичным тем, что наблюдаются в клетках млекопитающих. Это особенно важно для производства терапевтических белков, поскольку эти модификации могут существенно влиять на стабильность, активность и иммуногенность белка. Было показано, что Pichia pastoris продуцирует белки с паттернами гликозилирования, подобными человеческим, что делает её привлекательным выбором для производства биофармацевтических препаратов. Хорошо отлаженная система экспрессии Pichia pastoris — ещё одна причина, по которой исследователи часто выбирают этот вид дрожжей в качестве организма-хозяина. Система основана на сильном и строго регулируемом промоторе гена алкогольоксидазы 1 (AOX1), что обеспечивает высокий уровень экспрессии целевого белка. Экспрессию можно легко индуцировать добавлением метанола в питательную среду, а целевой белок может эффективно секретироваться в культуральную среду, упрощая последующие процессы очистки. Кроме того, Pichia pastoris обладает преимуществом в производстве правильно свёрнутых и функциональных белков. Секреторный аппарат дрожжей обеспечивает правильное свёртывание белков и образование дисульфидных связей, что приводит к образованию активных и биологически значимых белков. Это особенно важно для производства сложных белков, требующих специфических процессов свёртывания и сборки.