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Microscópios - Curso Preparatório Concurso Público: Biomédico | Bioquímico | Análises Clínicas Conteúdo Microscópios: tipos, partes e funções Prof. Dr. Victor Proença Tipos de Microscopia Microscopia de luz (óptica): detalhes de até 200 nanômetros Microscopia eletrônica: usam feixe de elétrons; lentes eletrostáticas e eletromagnéticas; nível de resolução de 0,2 nanômetros. Microscopia de ponta de prova Microscopia de luz (óptica) Microscopia de campo claro Microscópio invertido Microscopia de campo escuro Microscópio ultravioleta Microscópio de fluorescência Microscópio de contraste de fase Microscópio de polarização Microscopia de campo claro Microscópio invertido Microscopia de campo escuro Capta a luz que foi dispersa ou refratada pelas estruturas na amostra Aplicação: indicada para amostras com pouco contraste Microscopia de contraste de fase Permite ajustar fase da luz = maior contraste; facilita visualização; cria contraste otimizado Vantagem = observar espécime sem precisar de coloração Utilização = analisar e observar o intercurso biológico das células vivas Estrutura = usa diafragma anular próximo ao condensador, entre objetivas e oculares Microscópio de polarização Constituído por dois prismas – um polarizador e outro analisador Utilizado na observação de materiais birrefringentes (estruturas anisotrópicas, com índices diferentes de refração como os ossos, músculos, fibras, cabelos, etc.) Microscópio ultravioleta e de fluorescência Aumento maior Possível analisar substâncias absorvidas pelos organismos estudados Fluorescência = uso de fluorocromos Microscópio confocal Aumenta o contraste da imagem Constrói imagens tridimensionais Permite grande definição em amostras mais espessas Microscopia eletrônica Transmissão: amplia até um milhão x; emissão de feixe de elétrons que interage com a amostra enquanto a atravessa Varredura: Imagens em alta resolução; amplia até 100 mil x; imagens tridimensionais; observação de superfícies Questão 1 UFU-MG - 2018 - Biomédico Em relação aos tipos de microscopia, assinale a alternativa correta. Alternativas A) Microscopia de contraste de fase utiliza filtros que induzem a saída de feixes unidirecionais de luz. B) Na Microscopia eletrônica de transmissão, os elétrons não atravessam a amostra. C) Microscopia confocal utiliza lasers para a excitação de moléculas fluorescentes. D) Microscopia de luz polarizada é utilizada como rotina em cultivo de células. Questão 1 Justificativa A) Microscopia de contraste de fase utiliza filtros que induzem a saída de feixes unidirecionais de luz. - INCORRETA Contraste de fase: Sistema de filtros (anéis de fase) interfere no trajeto da luz, criando um contraste de contorno claro e escuro em torno das estruturas celulares a partir de diferenças nesse trajeto Microscópio de polarização: composto por dois discos polaroides ou primas posicionados entre a fonte de luz e o condensador; conduz a luz pelo filtro em apenas uma direção. Esta é polarizada em um plano conforme a mesma atravessa o primeiro filtro até atingir a amostra. Em outras palavras, a luz polarizada - por não se propagar para todas as direções assim como a luz convencional - possibilita a análise em pedras, metais, plásticos, cristais, ossos, esmalte dentários, espermatozoides, DNA, entre muitos outros. Questão 1 Justificativa B) Na Microscopia eletrônica de transmissão, os elétrons não atravessam a amostra. - INCORRETA Esta análise exige que as amostras sejam muito finas, para que o feixe de elétrons seja capaz de atravessá-las. Questão 1 Justificativa C) Microscopia confocal utiliza lasers para a excitação de moléculas fluorescentes. - CORRETA Permite a obtenção de imagens de alta resolução através de cortes ópticos, posteriormente agrupados para se fazer a reconstrução tridimensional da topografia de objetos complexos. Possibilita a eliminação de informações fora de foco da imagem, o que favorece a aquisição de amostras mais espessas, como biofilmes bacterianos, estruturas fúngicas, tecidos dentários e dentre outros tipos celulares Questão 1 Justificativa D) Microscopia de luz polarizada é utilizada como rotina em cultivo de células. - INCORRETO Microscópio invertido: permite a observação de células vivas, amostragem e manipulação de células, captura de imagens e observação de fluorescência. Microscópio de polarização: composto por dois discos polaroides ou primas posicionados entre a fonte de luz e o condensador; conduz a luz pelo filtro em apenas uma direção. Esta é polarizada em um plano conforme a mesma atravessa o primeiro filtro até atingir a amostra. Em outras palavras, a luz polarizada - por não se propagar para todas as direções assim como a luz convencional - possibilita a análise em pedras, metais, plásticos, cristais, ossos, esmalte dentários, espermatozoides, DNA, entre muitos outros.