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Toxoplasmose Conception et production d'outils innovants à visée thérapeutique et immunodiagnostique

La Toxoplasmose est une zoonose cosmopolite dont l’agent pathogène est un protozoaire intracellulaire obligatoire : Toxoplasma (T.) gondii. L’infection est habituellement sans gravité chez l’adulte immunocompétent. En cas d’immunodépression, la réactivation des parasites chez un patient ayant déjà contracté la toxoplasmose est possible. Par ailleurs, en cas de primo-infection toxoplasmique chez la femme enceinte, le parasite peut passer la barrière placentaire et entrainer des malformations graves chez le fœtus d’où l’importance du screening sérologique au cours de la grossesse. A coté de son impact sur la santé humaine, le toxoplasme a la capacité d’infecter tous les mammifères et il est responsable d’un nombre non négligeable d’avortements et de mortalité in utero chez le bétail. Le sérodiagnostic de la toxoplasmose est systématiquement demandé dans les centres hospitaliers dès la première consultation prénatale. Malgré la fiabilité des techniques sérologiques actuelles pour la recherche d’immunoglobulines de classe G et M (IgG, IgM) spécifiques du toxoplasme, les préparations antigéniques restent basées sur des lysats de parasites, la purification de l’antigène membranaire majeur de T. gondii, SAG1 étant laborieuse. Nous développons au laboratoire des méthodes innovantes de production de la proteine SAG1 recombinante sous forme active chez l’hôte hétérologue Escherichia coli (E. coli). Nous avons évalué ses performances dans la détection des IgG spécifiques par la technique ELISA dans des prélèvements de sérum mais également de salive. En second volet à ces travaux et avec l’émergence de l’ingénierie moléculaire des anticorps (Ac) et la biotechnologie des protéines recombinantes une nouvelle génération d’Ac recombinants est apparue et a permit au fil des années de contourner certains problèmes liés à l’utilisation d’AcM conventionnels dans les domaines de la recherche fondamentale, du diagnostic et de la thérapie. De nombreux fragments d’Ac de petites tailles ont été conçus par génie génétique, dont le fragment variable simple-chaîne (scFv) monocaténaire (30 kDa) représente l'unité minimale de liaison à l'Ag. Dans le souci d’améliorer la détection diagnostique du parasite T. gondii d’une part, et de développer une approche thérapeutique anti-toxoplasmique d’autre part, deux approches ont été développées : i) La conception d’immunoconjugé recombinant scFv-Phosphatase alcaline pour la détection et la quantification du parasite T. gondii, de manière sensible et spécifique. ii) La conception et le remodelage du scFv-monomérique en un scFv-dimérique à visée immunothérapique anti-Toxoplasmique in vitro et/ou in vivo.