فك الشفرة كيف نقرأ لغة البروتينات скачать в хорошем качестве

فك الشفرة كيف نقرأ لغة البروتينات

1. استراتيجيات تحديد تسلسل البروتينات • التكسير الإنزيمي والكيميائي: يتم تقسيم البروتينات الطويلة إلى ببتيدات أصغر باستخدام كواشف متخصصة؛ حيث يكسر التربسين (Trypsin) الروابط عند الأحماض الأمينية (Lys أو Arg)، بينما يكسر بروميد السيانوجين (Cyanogen bromide) عند حمض (Met). • ترتيب القطع (Ordering Fragments): يتم تحديد الترتيب الصحيح لهذه القطع في السلسلة الأصلية من خلال البحث عن التداخلات (Overlaps) بين القطع الناتجة عن طرق تكسير مختلفة. • تحديد روابط ثنائي الكبريتيد: يتم ذلك بمقارنة الببتيدات الناتجة عن التكسير مع وبدون كسر روابط ثنائي الكبريتيد مسبقاً؛ حيث يظهر ببتيد جديد أكبر يربط بين قطعتين كانتا مفقودتين. 2. تقنيات طيف الكتلة (Mass Spectrometry) • المبدأ الأساسي: تعتمد هذه التقنية على قياس نسبة الكتلة إلى الشحنة (m/z) للجزيئات المتأينة في الفراغ، مما يسمح بتقدير الكتلة الجزيئية بدقة متناهية. • تقنيات التأين الحديثة: سمحت تقنيات مثل MALDI (التأين بالليزر) و ESI (التأين بالرش الكهربائي) بدراسة البروتينات الضخمة دون تحللها، وهو ما كان مستحيلاً في السابق. • طيف الكتلة الترادفي (Tandem MS): تقنية متطورة (MS/MS) تُستخدم لتحديد تسلسل قطع الببتيد القصيرة بسرعة فائقة عن طريق تكسيرها داخل الجهاز وقياس كتل الشظايا الناتجة. 3. العلاقة بين البروتين والـ DNA (البروتيوميكس) • التسلسل غير المباشر: يمكن استنتاج تسلسل الأحماض الأمينية من خلال تسلسل النوكليوتيدات في الجين المقابل، وهو أسرع وأكثر دقة في حال توفر الجين. • البروتيوم (Proteome): مصطلح يُطلق لوصف المجموعة الكاملة من البروتينات التي يتم التعبير عنها بواسطة المحتوى الجيني (Genome) للكائن الحي. 4. التصنيع الكيميائي للببتيدات • طريقة ميريفيلد (Merrifield): تعتمد على بناء سلسلة الببتيد حمضاً تلو الآخر بينما تظل مرتبطة بـ دعامة صلبة (Resin) غير قابلة للذوبان، مما يسهل عملية التنقية بعد كل خطوة. • الأتمتة: أصبحت عملية تصنيع الببتيدات الآن آلية بالكامل، وهي ضرورية لإنتاج الأدوية ودراسة وظائف البروتينات. التاجات: #تسلسل_البروتينات #طيف_الكتلة #تخليق_الببتيدات #البروتيوم #التربسين #الكيمياء_الحيوية #MALDI #الوراثة_الجزيئية